1、場地空間
細(xì)胞培養(yǎng)室與其它理科實(shí)驗(yàn)室的不同,在于其具有生物屏蔽區(qū),也就是說細(xì)胞培養(yǎng)室有一個(gè)地方可以按照研究者的意愿,能夠?qū)崿F(xiàn)決定該區(qū)域有生命現(xiàn)象或者只有一種特定的生命體,也就是細(xì)胞培養(yǎng)室里特定的地方只能存在一種希望的生命體,主要是細(xì)胞形式的,否則,就不是細(xì)胞培養(yǎng)室。該區(qū)域均分別用玻璃和鋁合金框架分隔,吊頂封閉但不壓抑,由相應(yīng)的門、洞相通,并安置紫外消毒燈,以便于進(jìn)行日常無菌環(huán)境維護(hù)。該區(qū)域的面積由超凈臺(tái)的數(shù)量和大小相應(yīng)調(diào)整,太大浪費(fèi)空間,太小不方便。安裝有空調(diào)和過濾通風(fēng)設(shè)備。除此之外,還應(yīng)該有一個(gè)普通的生物實(shí)驗(yàn)空間。普通細(xì)胞培養(yǎng)室的空間,一般來說40 m2左右可以滿足需要??偟脑瓌t是布局合理,方便操作。
(1)無菌區(qū)。對(duì)于普通細(xì)胞培養(yǎng)室,無菌區(qū)是整個(gè)細(xì)胞生長過程的無菌環(huán)境、細(xì)胞培養(yǎng)劑、細(xì)胞培養(yǎng)瓶和一定時(shí)間內(nèi)無菌的超凈臺(tái),由于前3個(gè)無菌區(qū)可以移動(dòng)而且空間小,因此,無菌區(qū)的空間主要取決于凈化臺(tái)的數(shù)量和大小。
(2)凈化區(qū)。圍繞著超凈臺(tái),需要一個(gè)相對(duì)干凈的環(huán)境,也就是細(xì)菌少,灰塵少??諝庵械奈⑸镌缴伲?xì)胞培養(yǎng)就不易被污染??諝庵谢覊m會(huì)成為細(xì)菌的運(yùn)載工具,而且灰塵會(huì)堵塞無菌過濾系統(tǒng),影響無菌效果和儀器的使用壽命。這個(gè)范圍是研究工作者操作細(xì)胞的活動(dòng)空間,大小圍繞凈化臺(tái)1 m左右范圍。
(3)緩沖區(qū)。作為消毒物品存放和隔離帶,研究者的工作服與工作鞋可以在這個(gè)地方換用,以便于減少研究者從外面帶進(jìn)來的細(xì)菌和灰塵。
(4)普通區(qū)。是作為細(xì)胞培養(yǎng)體系的支撐系統(tǒng),類似于普通生物實(shí)驗(yàn)室,除了儀器設(shè)備外,還有相應(yīng)的固定臺(tái)面,用于放置儀器設(shè)備和簡單的細(xì)胞培養(yǎng)有菌操作實(shí)驗(yàn),當(dāng)然,實(shí)驗(yàn)室還有基本的供水、供電,以及生物廢水排放系統(tǒng)。還要考慮通風(fēng)和采光。
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室儀器配置
隨著技術(shù)的進(jìn)步和相關(guān)領(lǐng)域研究的不斷深入,細(xì)胞培養(yǎng)裝置得到了充分的發(fā)展,用于研究和生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)裝置已經(jīng)發(fā)展成系統(tǒng)、成規(guī)模[5]。對(duì)于普通細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室的建設(shè),配置儀器非常關(guān)鍵,以簡單實(shí)用為基本原則,太多、太貴經(jīng)費(fèi)不允許,空間有限,也沒這個(gè)必要。設(shè)備如下:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)箱。細(xì)胞培養(yǎng)箱是細(xì)胞生長的大環(huán)境,保障為細(xì)胞提供37℃、5%二氧化碳、飽和濕度的恒定條件。一般配備2臺(tái),用三通管與二氧化碳鋼瓶相連,2臺(tái)是為防備儀器出故障時(shí)的保證細(xì)胞有生長的環(huán)境。當(dāng)然,二氧化碳鋼瓶要3個(gè):①便于公司送氣,②使用,③實(shí)驗(yàn)室預(yù)備。
(2)超凈臺(tái)。這是細(xì)胞培養(yǎng)室用于研究者直接操作細(xì)胞的狹小空間。一般說來,具有生物安全功能的2臺(tái)超凈臺(tái),足夠裝備普通細(xì)胞培養(yǎng)室,1臺(tái)全排,用于細(xì)胞的化學(xué)物理處理等操作,1臺(tái)半排用于一般細(xì)胞培養(yǎng)操作。這樣的配置是需要的,細(xì)菌超凈臺(tái)則不適合細(xì)胞培養(yǎng),忽視了對(duì)研究者的保護(hù),與科學(xué)發(fā)展不相適應(yīng)。超凈臺(tái)內(nèi)通常配置酒精燈、試劑架、鑷子、消毒棉球、火柴等用品。
(3)倒置顯微鏡。用于觀察細(xì)胞的生長狀態(tài)。目前產(chǎn)品中,鏡下真實(shí)的反映細(xì)胞的生長情況,而且視野開闊,經(jīng)久耐用。
(4)離心機(jī)。在組織分離和細(xì)胞操作中,經(jīng)常會(huì)用到的設(shè)備,不要求太高,普通產(chǎn)品均能滿足需要。一般來說,離心體積到達(dá)100 ml,離心力400既可??梢耘c其他實(shí)驗(yàn)室共用。
(5)冰箱。保存生物試劑等,普通冰箱可以配置2臺(tái),超低溫冰箱1臺(tái),均要帶鎖,帶鎖的作用是為了便于管理。
(6)液氮罐。用于長期保存細(xì)胞,至少2個(gè)。
3、消毒和洗滌設(shè)施
一般的生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室都有,不需要專門為某一個(gè)功能性實(shí)驗(yàn)室單獨(dú)配置,細(xì)胞培養(yǎng)室經(jīng)常會(huì)用到,因此,細(xì)胞培養(yǎng)室盡量不要離開太遠(yuǎn),減少耗材消毒處理往返無意義時(shí)間消耗。細(xì)胞培養(yǎng)室的屏蔽區(qū)除了超凈臺(tái),其他的設(shè)備均安置在普通區(qū),按照房間結(jié)構(gòu)和屏蔽區(qū)位置,合理安排設(shè)備,如果空間緊張,可以把超低溫冰箱和液氮罐安置在其他房間。其實(shí),儀器的安置跟家庭安放家具很相似,既整齊美觀又舒適方便。實(shí)驗(yàn)室區(qū)域在規(guī)劃上要做到合理布局,人物分流,設(shè)備布置井然有序。
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