無菌室一般是在微生物實驗室內(nèi)專辟的一個小房間,面積不宜過大,約4m2~5m2,高2.5m左右即可。無菌室外要設(shè)一個緩沖間、凈化風(fēng)淋間及更衣間。無菌室和緩沖間都須密閉。室內(nèi)裝備須有空氣過濾裝置。無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈,無菌室的紫外線燈距離工作臺面1m。無菌室內(nèi)的地面、墻壁須平整,不易藏污垢,便于清潔。工作臺的臺面須處于水平狀態(tài)。工作人員進(jìn)入無菌室應(yīng)在更衣室穿戴好滅菌的衣、帽、鞋,經(jīng)過凈化風(fēng)淋室,再到緩沖間,然后進(jìn)入無菌室進(jìn)行檢驗工作??h級市的企業(yè)一般實驗室多使用小型超凈工作臺。超凈工作臺其結(jié)構(gòu)簡單,便于移動,工作臺內(nèi)有紫外燈和凈化風(fēng)機,外部是推拉式小門或開兩個洞的玻璃門,操作時將雙臂伸進(jìn)去即可。對于無菌室一般有如下的要求:
(1)無菌操作間的潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級,室內(nèi)溫度保持在20℃~24℃,濕度保持在45%~60%,超凈臺潔凈度應(yīng)達(dá)到100級。無菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù),在無菌室或超凈工作臺開啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的15mL,放至凝固后,倒置于36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,證明無菌后,取平板3~5個,分別放置在工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,10000級的潔凈室平均不得超過3個菌落,如超過限度,應(yīng)對無菌室進(jìn)行徹底消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。
(2)無菌室應(yīng)保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、打火機、鑷子、接種環(huán)、剪刀及玻璃筆等。嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
(3)無菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等等。
(4)需要帶入無菌室使用的儀器、藥品、玻璃器皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密或應(yīng)經(jīng)適宜的方法滅菌。如培養(yǎng)皿、吸管用不銹鋼筒裝好在160℃~170℃的干燥箱中滅菌1h~2h;生理鹽水用高壓滅菌器于121℃滅菌20分鐘等。
(5)無菌室使用前須打開無菌室和緩沖間的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時打開凈化風(fēng)機進(jìn)行換氣。在紫外燈關(guān)閉后半小時方可進(jìn)入無菌室進(jìn)行工作。在樣品檢驗完畢后,應(yīng)及時清理剩余樣品和各種藥品及玻璃器皿,安全退出后再打開所有紫外燈輻照滅菌30分鐘。
(6)送檢樣品在檢驗前應(yīng)保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢驗前,用75%的酒精棉球消毒外表面,必要時用點燃的酒精棉進(jìn)行滅菌。
(7)每次操作過程中,均應(yīng)做空白對照,以檢查無菌操作的可靠性。
(8)吸取菌液時,須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管,如吸管碰到手及其它未滅菌的物體,須重新更換,以防污染。
(9)接種針每次使用前后,須通過火焰燃燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
(10)帶有菌液的吸管、試管等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%的來蘇兒溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24h取出沖洗;培養(yǎng)皿則需在高壓滅菌器中重新滅菌后方可處理營養(yǎng)基,切記不要直接沖入下水道中,防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇兒傾覆在被污染處至少30min,再做處理,工作衣帽等受到菌液污染時,應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
無菌室裝修
無菌室裝修一般包括潔凈室地面、墻板、吊頂、及配套的空調(diào)、照明、消防、給排水等與潔凈室相關(guān)的內(nèi)容,根據(jù)要求,潔凈廠房的建筑圍護(hù)結(jié)構(gòu)和室內(nèi)裝修,應(yīng)選用氣密性良好,且在溫度和濕度變化時變形小的材料。潔凈室內(nèi)墻壁和頂棚的裝修應(yīng)符合下列要求:
(1)無菌室內(nèi)墻壁和頂棚的表面應(yīng)平整、光滑、不起塵、避免眩光、便于除塵,并應(yīng)減少凹凸面。
(2)無菌室不宜采用砌筑墻抹灰墻面,當(dāng)采用時宜干燥作業(yè),抹灰應(yīng)采用高級抹灰標(biāo)準(zhǔn)。墻面抹灰后應(yīng)刷涂料面層,并應(yīng)選用難燃、不開裂、耐清洗、表面光滑、不易吸水變質(zhì)發(fā)霉的涂料。這樣一般情況下潔凈室裝修主要選擇比較好的彩涂金屬壁板作為內(nèi)裝修材料。但是對于高大空間廠房來說,因?qū)痈弑容^高,對金屬壁板隔墻的安裝比較困難,強度差,造價高,不能承重等問題。本工程分析了高大廠房潔凈室產(chǎn)塵的特點及房間潔凈度的要求,沒有采用常規(guī)的金屬壁板的內(nèi)裝修做法,在原有土建墻體上打磨進(jìn)行環(huán)氧涂層,整個空間不設(shè)吊頂,增加使用空間。
無菌室氣流組織
對于高大潔凈廠房,采用潔凈分層空調(diào)系統(tǒng)可以使系統(tǒng)的總送風(fēng)量大為減少。風(fēng)量減少了,要得到較好的潔凈空調(diào)效果,采用合理的氣流組織就顯得尤為重要,既要保證送風(fēng)和回風(fēng)系統(tǒng)的均勻性,減少潔凈工作區(qū)的渦流和氣流回旋,又要增強送風(fēng)氣流的擴散特性,充分發(fā)揮送風(fēng)氣流的稀釋作用。在萬級或十萬級潔凈度要求的高大潔凈廠房中,可以引用舒適性空調(diào)高大空間的設(shè)計理念,如機場、展館等大空間使用噴口的方式。采用噴口,側(cè)面送風(fēng),氣流可以擴散較長的距離,噴口送風(fēng)是依靠噴口吹出的高速射流實現(xiàn)送風(fēng)的方式,主要實用于高大廠房或者層高很高的公共建筑空間的空氣調(diào)節(jié)場所。噴口采用側(cè)送風(fēng),將噴口與回風(fēng)口布置在同一側(cè),空氣以較高的速度、較大的風(fēng)量集中由設(shè)置在空間上的若干個噴口射出,射流行至一定路程后折回,使整個空調(diào)區(qū)處于回流區(qū),然后有設(shè)在下部的回風(fēng)口抽走返回空調(diào)機組。其特點是,送風(fēng)速度高、射程遠(yuǎn)。射流帶動室內(nèi)空氣進(jìn)行強烈混合,速度逐漸衰減,并在室內(nèi)形成大的回旋氣流,從而使空調(diào)區(qū)獲得較均勻的溫度場和速度場。
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