無菌室一般是在微生物實驗室內專辟的一個小房間,面積不宜過大,約4m2~5m2,高2.5m左右即可。無菌室外要設一個緩沖間、凈化風淋間及更衣間。無菌室和緩沖間都須密閉。室內裝備須有空氣過濾裝置。無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈,無菌室的紫外線燈距離工作臺面1m。無菌室內的地面、墻壁須平整,不易藏污垢,便于清潔。工作臺的臺面須處于水平狀態(tài)。工作人員進入無菌室應在更衣室穿戴好滅菌的衣、帽、鞋,經過凈化風淋室,再到緩沖間,然后進入無菌室進行檢驗工作??h級市的企業(yè)一般實驗室多使用小型超凈工作臺。超凈工作臺其結構簡單,便于移動,工作臺內有紫外燈和凈化風機,外部是推拉式小門或開兩個洞的玻璃門,操作時將雙臂伸進去即可。對于無菌室一般有如下的要求:
(1)無菌操作間的潔凈度應達到10000級,室內溫度保持在20℃~24℃,濕度保持在45%~60%,超凈臺潔凈度應達到100級。無菌室應每月檢查菌落數(shù),在無菌室或超凈工作臺開啟的狀態(tài)下,取內徑90mm的無菌培養(yǎng)皿若干,無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的15mL,放至凝固后,倒置于36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,證明無菌后,取平板3~5個,分別放置在工作位置的左中右等處,開蓋暴露30分鐘后,倒置于36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h,取出檢查。100級潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過1個菌落,10000級的潔凈室平均不得超過3個菌落,如超過限度,應對無菌室進行徹底消毒,直至重復檢查合乎要求為止。
(2)無菌室應保持清潔整齊,室內僅存放須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、打火機、鑷子、接種環(huán)、剪刀及玻璃筆等。嚴禁堆放雜物,以防污染。
(3)無菌室應備有工作濃度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等等。
(4)需要帶入無菌室使用的儀器、藥品、玻璃器皿等一切物品,均應包扎嚴密或應經適宜的方法滅菌。如培養(yǎng)皿、吸管用不銹鋼筒裝好在160℃~170℃的干燥箱中滅菌1h~2h;生理鹽水用高壓滅菌器于121℃滅菌20分鐘等。
(5)無菌室使用前須打開無菌室和緩沖間的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時打開凈化風機進行換氣。在紫外燈關閉后半小時方可進入無菌室進行工作。在樣品檢驗完畢后,應及時清理剩余樣品和各種藥品及玻璃器皿,安全退出后再打開所有紫外燈輻照滅菌30分鐘。
(6)送檢樣品在檢驗前應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染。檢驗前,用75%的酒精棉球消毒外表面,必要時用點燃的酒精棉進行滅菌。
(7)每次操作過程中,均應做空白對照,以檢查無菌操作的可靠性。
(8)吸取菌液時,須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管,如吸管碰到手及其它未滅菌的物體,須重新更換,以防污染。
(9)接種針每次使用前后,須通過火焰燃燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
(10)帶有菌液的吸管、試管等器皿應浸泡在盛有5%的來蘇兒溶液的消毒桶內消毒,24h取出沖洗;培養(yǎng)皿則需在高壓滅菌器中重新滅菌后方可處理營養(yǎng)基,切記不要直接沖入下水道中,防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上,應立即用5%石碳酸溶液或3%的來蘇兒傾覆在被污染處至少30min,再做處理,工作衣帽等受到菌液污染時,應立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
無菌室裝修
無菌室裝修一般包括潔凈室地面、墻板、吊頂、及配套的空調、照明、消防、給排水等與潔凈室相關的內容,根據(jù)要求,潔凈廠房的建筑圍護結構和室內裝修,應選用氣密性良好,且在溫度和濕度變化時變形小的材料。潔凈室內墻壁和頂棚的裝修應符合下列要求:
(1)無菌室內墻壁和頂棚的表面應平整、光滑、不起塵、避免眩光、便于除塵,并應減少凹凸面。
(2)無菌室不宜采用砌筑墻抹灰墻面,當采用時宜干燥作業(yè),抹灰應采用高級抹灰標準。墻面抹灰后應刷涂料面層,并應選用難燃、不開裂、耐清洗、表面光滑、不易吸水變質發(fā)霉的涂料。這樣一般情況下潔凈室裝修主要選擇比較好的彩涂金屬壁板作為內裝修材料。但是對于高大空間廠房來說,因層高比較高,對金屬壁板隔墻的安裝比較困難,強度差,造價高,不能承重等問題。本工程分析了高大廠房潔凈室產塵的特點及房間潔凈度的要求,沒有采用常規(guī)的金屬壁板的內裝修做法,在原有土建墻體上打磨進行環(huán)氧涂層,整個空間不設吊頂,增加使用空間。
無菌室氣流組織
對于高大潔凈廠房,采用潔凈分層空調系統(tǒng)可以使系統(tǒng)的總送風量大為減少。風量減少了,要得到較好的潔凈空調效果,采用合理的氣流組織就顯得尤為重要,既要保證送風和回風系統(tǒng)的均勻性,減少潔凈工作區(qū)的渦流和氣流回旋,又要增強送風氣流的擴散特性,充分發(fā)揮送風氣流的稀釋作用。在萬級或十萬級潔凈度要求的高大潔凈廠房中,可以引用舒適性空調高大空間的設計理念,如機場、展館等大空間使用噴口的方式。采用噴口,側面送風,氣流可以擴散較長的距離,噴口送風是依靠噴口吹出的高速射流實現(xiàn)送風的方式,主要實用于高大廠房或者層高很高的公共建筑空間的空氣調節(jié)場所。噴口采用側送風,將噴口與回風口布置在同一側,空氣以較高的速度、較大的風量集中由設置在空間上的若干個噴口射出,射流行至一定路程后折回,使整個空調區(qū)處于回流區(qū),然后有設在下部的回風口抽走返回空調機組。其特點是,送風速度高、射程遠。射流帶動室內空氣進行強烈混合,速度逐漸衰減,并在室內形成大的回旋氣流,從而使空調區(qū)獲得較均勻的溫度場和速度場。